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漆酶測試盒微量法

簡要描述:漆酶測試盒微量法公司正在出售的產品:血瓊脂基礎進口、國產Blood Agar Base250克供分離營養(yǎng)要求較高的致病菌用改良羅氏基礎進口、國產L-G Medium Base,Modified250克結核桿菌的培養(yǎng),計數(shù)保存,照光試驗,藥物敏感性測定及菌型鑒定MiddleBrook 7H10瓊脂進口、國產MiddleBrook 7H10 Agar250克分枝桿菌的分離培養(yǎng)MiddleBrook 7

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-24
  • 訪  問  量:847

詳細介紹

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據!

產品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

漆酶測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6937

商品介紹:

測定意義:

漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。

測定原理

漆酶分解底物ABTS產生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠大于底物ABTS,測定ABTS自由基的增加速率,可計算得漆酶活性。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

100mL β- 巰基乙醇 β-Mercaptoethanol 室溫避光保存

50T 腦膜炎細菌多重PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

1 g 5-FITC Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

100mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.4   Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.4   常溫保存

50次 脈沖電泳Marker(酵母染色體PFG)  

50T 埃博拉病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

酪蛋白胨大豆吐溫20 Casein DigestSoy LecithinPolysorbate 20 Medium 250g

1瓶 HaCaT細胞株 HaCaT 低溫運輸和保存

250mlPreston肉湯均質袋(雙料)  250ml/袋*10

1000 U 限制性內切SalI Restriction Endonuclease -20℃保存

125mL RIPA Buffer with Glycerol,2X  RIPA Buffer with Glycerol,2X  常溫保存

漆酶測試盒微量法FBRSL1  毒X蛋白反轉錄蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml

IL-6 (NT)  白介素6抗體(N端) 規(guī)格: 0.1ml

gamma tubulin(Centrosome Marker )  微管蛋白-γ抗體 規(guī)格: 0.1ml

RPS6KB1  核糖體S6蛋白激抗體 規(guī)格: 0.1ml

Nucleophosmin  核仁磷酸蛋白抗體 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

CDK4  周期素依賴性激4抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-FXYD1 (Ser83)  磷酸化磷酸神經膜抗體 規(guī)格: 0.1ml

UTS2D  尾加壓素2相關肽抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SGK1 (Thr256)  磷酸化糖皮質激素調節(jié)激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

IL-33  白介素33抗體 規(guī)格: 0.1mlIL-15  白介素15抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-EGFR (Ser1070)  磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1mlCKAP4  細胞骨架相關蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

human C3  補體C3抗體 規(guī)格: 0.1mlCD38  CD38抗體 規(guī)格: 0.1ml

IQCA1  IQCA1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlGLUT3  葡萄糖轉運蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml



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