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植酸酶測試盒微量法

簡要描述:植酸酶測試盒微量法公司正在出售的產品:需氣菌厭氣菌進口、國產Thioglycollate Medium250克用于培養需氧菌、微需氧菌和厭氧菌抗菌素磺胺類敏感試驗瓊脂進口、國產ASS Agar250克用于磺胺類靈敏度試驗(WHO方法)通用培養肉湯進口、國產AC Broth250克用于常見微生物增菌培養和不含防腐劑樣品的無菌試驗卵黃高鹽瓊脂基礎進口、國產Egg-Yolk Salt Agar Base

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-24
  • 訪  問  量:710

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉化為可供有機體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對環境的污染,改善營養成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應用價值。

測定原理

植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無機磷與肌醇衍生物,無機磷在酸性環境中與鉬酸銨顯色劑反應生成藍色復合物,在700nm處有特征吸收峰,根據700nm處吸光值變化可計算得植酸酶活性。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、可見分光光度計、微量石英比色皿、恒溫水浴鍋,超聲溶解器,回旋式振蕩器。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

植酸酶測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6939

QQ截圖20220307153537.png 

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

支原體檢測  

2 ug pUG6.0 pUG6.0 低溫運輸,-20℃保存

225mlGN增菌液均質袋 GN Enrichment Broth 10個/包

2000 U 限制性內切ApaI Restriction Endonuclease -20℃保存

250mL Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.2   Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.2   常溫保存

5mL 素 B 硫酸鹽 Polymyxin B Sulfate Solution 4℃避光保存

2 ug pQE-2 pQE-2 低溫運輸,-20℃保存

7%NaCl胰胨水  20支

2 ug pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-Puro pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-Puro 低溫運輸,-20℃保存

靛基質試驗用 Indole Test Medium 250g

2 ug pLVUT-tTR-KRAB pLVUT-tTR-KRAB 低溫運輸,-20℃保存

植酸酶測試盒微量法Staphyloccocus aureus Rosenbach tropina  金菌體蛋白抗體 規格: 1mlDonkey anti-Gpig IgG whole serum  驢抗豚鼠IgG抗清 規格: 1ml

Rabbit Anti-Avidin/PE  PE標記的兔抗親和素 規格: 0.1mlPLCG 1/PLC gamma 1  磷酯Cγ1抗體 規格: 0.2ml

SOD2  超氧化物歧化2抗體 規格: 0.1ml

ENTHD1/Epsin2B  Epsin2B蛋白抗體 規格: 0.2ml

Galactosidase alpha  α-半糖苷抗體 規格: 0.2ml

GPR78  G蛋白偶聯受體78抗體 規格: 0.2ml

Phospho-cdc25A (Ser124)  磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/APC  APC標記的兔抗大鼠IgG 規格: 0.1ml

WNK1  賴缺陷型蛋白激1抗體 規格: 0.2ml

phospho-Ephrin B(Ser300)  磷酸化Ephrin B抗體 規格: 0.1ml

DDIT4/REDD1  DNA損傷誘導轉錄蛋白4抗體 規格: 0.1ml

TGF Beta 1(CT)  轉化生因子β1抗體 規格: 0.2ml

 


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