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當(dāng)前位置:首頁(yè)   >  產(chǎn)品中心  >  生化檢測(cè)試劑盒  >  土壤系列  >  土壤多酚氧化酶(SPPO)測(cè)試盒微量法

土壤多酚氧化酶(SPPO)測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:土壤多酚氧化酶(SPPO)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:我妻氏基礎(chǔ) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Wagstsuma Agar Base用于神奈川現(xiàn)象試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))25060%/L氯化鈉蛋白胨肉湯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)60%/L NaCl Peptone Water用于副溶血性弧菌的前增菌培養(yǎng)250氯化鈉三糖鐵 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)NaCl Triple Sugar Iron Agar用于副溶血性弧菌的生化反應(yīng)

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間:2023-12-25
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:1425

詳細(xì)介紹

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱(chēng):土壤多酚氧化酶(SPPO)測(cè)試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

檢測(cè)方法:微量法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6820

產(chǎn)品分類(lèi):土壤系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

S-PPO主要來(lái)源于土壤微生物、植物根系分泌物及動(dòng)植物殘?bào)w分解釋放,催化土壤中芳香族化合物氧化成醌,醌與土壤中蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類(lèi)、礦物等物質(zhì)反應(yīng)生成有機(jī)質(zhì)和色素,完成土壤芳香族化合物循環(huán),用于土壤環(huán)境修復(fù)。

測(cè)定原理:

S-PPO能夠催化鄰苯三酚產(chǎn)生紫色物質(zhì),后者在430nm有特征光吸收。

自備用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、25mL(不允許快遞)、研缽、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

2 ug PT2/RMCE-puDTK PT2/RMCE-puDTK 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ) Listeria Enrichment Broth Base 250g

5u 氧化 Xanthine Oxidase 4℃保存

50T 轉(zhuǎn)基因植物TETR基因PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50 T 肽一還原測(cè)試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

250mL Maleate Buffer(馬來(lái)酸緩沖液),0.2M,pH6.5  Maleate Buffer,0.2M,pH6.5  常溫保存

25OD G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類(lèi)似物 RNA Cap Structure Analogs -20℃保存

2 ug pLVX-EF1α-mCherry-C1 pLVX-EF1α-mCherry-C1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

改良GAM瓊脂 GAM Agar,Modified 250g

2 ug pKD3 pKD3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

匹克氏肉湯基礎(chǔ)A Pick’s Broth BaseA 100g

土壤多酚氧化酶(SPPO)測(cè)試盒微量法Phospho-DBC1 (Thr454)  磷酸化膀胱缺失基因1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Bone Sialoprotein/BSP  骨涎蛋白 0.1ml

Mouse Anti-Rabbit IgM/APC  APC標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1ml

GRP75  G蛋白偶聯(lián)受體75抗體 規(guī)格: 0.2ml

CACNA1A/Cav2.1  電壓依賴(lài)性鈣通道Cav2.1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgM  羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 1mg

Gab1  接蛋白Gab 1抗體 規(guī)格: 0.1ml

PEN2   早老素γ分泌2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

TGF alpha  轉(zhuǎn)移生因子α抗體 規(guī)格: 0.1ml

ATAD3A/B/C  三磷酸苷家族蛋白3A抗體 規(guī)格: 0.2ml

GAS2L1  生停滯特異性蛋白2家族1抗體 規(guī)格: 0.2ml 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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