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蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒微量法

簡要描述:蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:淀粉水解培養(yǎng)基 英文名稱:The Hydrolysis of Starch Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基 英文名稱:Silicate Bacteria Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g GVC增菌液 英文名稱:GVC Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g BSSA培養(yǎng)基 英文名稱:BSSA Medi

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-26
  • 訪  問  量:798

詳細(xì)介紹

商品介紹:

測定意義:

蔗糖是源(葉片等)光合產(chǎn)物向"器官運(yùn)輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是雙向反應(yīng)酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一。研究其分解方向SS-Ⅰ的活性對于植物蔗糖降解以及淀粉合成具有重要意義。

測定原理

SS-Ⅰ催化蔗糖和UDP生成游離果糖和UDPG,采用3,5-二硝基水楊酸法測定還原糖的含量來反映酶活性的高低。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費(fèi)代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6703

11.png 

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

1瓶 C1.Ly1+2-/9細(xì)胞株 C1.Ly1+2-/9 低溫運(yùn)輸和保存

50mL RIPA Buffer,5X  RIPA Buffer,5X  常溫保存

1 管 DB3.1大腸桿菌 DB3.1 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRetroX-IRES-ZsGreen1 pRetroX-IRES-ZsGreen1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

副溶血性弧菌成套生化鑒定管(SN/T0173-2010)  16種*1套/盒*5盒

2 ug pcDNA3.1(+)/GFP pcDNA3.1(+)/GFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

營養(yǎng)鹽瓊脂 Nutrient agar 250g

100g 馬來酸 Maleic Acid 室溫密封保存

50T 諾沃克病毒PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

1g 氯吡苯脲 Forchior Fennron    室溫保存

100mL Bicine Buffer,0.5M,pH8.5   Bicine Buffer,0.5M,pH8.5   常溫保存

蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒微量法AKAP2  蛋白激A2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

CD329/SIGLEC8  CD329抗體 規(guī)格: 0.2ml

KCNE1  鉀離子通道蛋白家族成員1抗體 規(guī)格: 0.2ml

DYDC1  DYDC1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Lamin A/C(Ser22)  磷酸化核纖層蛋白A/C抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-Dab1 (Tyr220)  磷酸化Disabled 1抗體 規(guī)格: 0.1ml

ACTH (18-39)  促上皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體 0.1ml

Mouse Anti-rabbit IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-CHEK1 (Ser296)  磷酸化細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CD336/NKp44/NCR2  細(xì)胞毒性受體NK-p44抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

 


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