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查爾酮異構酶(CHI)測試盒微量法

簡要描述:查爾酮異構酶(CHI)測試盒微量法公司正在出售的產品:柯氏尿素瓊脂 英文名稱: 產品規格:250g MLCB寒天培地 英文名稱:MLCB Agar 產品規格:250g GN增菌液(10ml) 英文名稱: 產品規格:10ml*20 H-頂層培養基 英文名稱: 產品規格:250g

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-28
  • 訪  問  量:1015

詳細介紹

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱:查爾酮異構酶(CHI)測試盒微量法

產品規格:100管/96樣

檢測方法:微量法

產品貨號:BK-01S6468

產品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:

測定意義:

查爾酮異構酶(Chalcone isomerase, CHI)是個被認識的黃酮類化合物合成相關酶,也是黃酮代謝途徑中的關鍵酶之一。查爾酮異構酶和查爾酮合酶一起構成了黃酮類化合物生物合成的限速酶。

測定原理:

查爾酮異構酶(CHI)催化查爾酮環化形成 4,5,7-三羥基黃烷酮,通過測定381nm下的吸光度變化表示CHI的活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

1瓶 P19細胞株 P19 低溫運輸和保存

葡萄糖瓊脂斜面管  20支/盒

100g 氯化鈣,二水 Calcium Chloride, Dihydrate 室溫干燥保存

250mL Triton Permeating Solution in TBS,10X  Triton Permeating Solution in TBS,10X  常溫保存

1mL 胰凝抑制劑溶液,20mg/mL Chymostatin Solution -20℃保存

2 ug pYES2-EGFP pYES2-EGFP 低溫運輸,-20℃保存

100次 一管式拭子DNAout One-Tube Swab DNAOUT 常溫

2 ug pEGFP- C1 pEGFP- C1 低溫運輸,-20℃保存

雙歧桿菌BS培養基 Bifidobacterium BS Medium 250g

50mg 反玉米素 Trans-Zeatin -20℃保存

50T 豬弓形蟲PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

查爾酮異構酶(CHI)測試盒微量法AER61  未知糖基化轉移AER61抗體 規格: 0.2ml

Phospho-Progesterone Receptor(Ser190)  磷酸化孕激素受體抗體 規格: 0.1ml

LIX1  LIX1抗體 規格: 0.2ml

KIF2B  有絲分裂驅動蛋白樣2B抗體 規格: 0.2ml

Acetyl-Histone H3(K18)  乙酰化組蛋白H3抗體 規格: 0.2ml

CAMKK2  鈣調蛋白激激β抗體 規格: 0.1ml

FBXO4  FBXO4蛋白抗體 規格: 0.2ml

Phospho-PKR (Thr451)  磷酸化蛋白激R抗體 規格: 0.1ml

LIF  白抑制因子抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/Cy7  Cy7標記的兔抗大鼠IgG 規格: 0.1ml

TCRG  T細胞受體γ抗體 規格: 0.2ml

α-Adaptin  銜接蛋白α抗體 規格: 0.1ml 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

 


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