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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  生化檢測試劑盒  >  氧化與抗氧化系列  >  多功能氧化酶(MFO)測試盒可見分光光度法

多功能氧化酶(MFO)測試盒可見分光光度法

簡要描述:多功能氧化酶(MFO)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:O/F培養(yǎng)基(HLGB) 英文名稱:O/F Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 氯化鈉結(jié)晶紫增菌液 英文名稱:Sodium Chloride Violet purple Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 氯化鈉蔗糖瓊脂 英文名稱:Sodium Chloride Sucrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 嗜鹽菌選擇性

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-28
  • 訪  問  量:689

詳細(xì)介紹

商品介紹:

測定意義:

多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶,可產(chǎn)生降解反應(yīng),可使原化學(xué)物質(zhì)變?yōu)榈投镜幕驘o毒的物質(zhì)從體內(nèi)排出;還可產(chǎn)生激活反應(yīng),可使原化學(xué)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為具有親電子性質(zhì),導(dǎo)致毒性增強(qiáng),成為致突變物或終致癌物。近年來對混合功能氧化酶系與外源性化學(xué)物質(zhì)相互作用的深入研究,對于從分子生物學(xué)水平上進(jìn)一步了解外源性化學(xué)物質(zhì)的毒作用具有重要意義。

測定原理:

MFO催化對硝基苯甲醚產(chǎn)生對硝基,在405nm下有特征吸光值。

自備用品:

分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

多功能氧化酶(MFO)測試盒可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

BK-01S6475

11.png 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

10mL DNA 稀釋液 DNA Diluent -20℃保存

2 ug pKK 223-3批次1 pKK 223-3批次1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

飲用水和水源水檢驗(yàn)培養(yǎng)基  

1瓶 MDA-MB-435S細(xì)胞株 MDA-MB-435S 低溫運(yùn)輸和保存

乳糖復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)基 Lactose Broth 250g

25g N- 氨基甲酰甲基乙磺酸 ACES 常溫保存

乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基 Lactose Broth 250g

2mL 肽瓊脂糖 Glutathione Agarose 4℃保存,切勿冷凍

2 ug pSUPER-retro-EGFP pSUPER-retro-EGFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100mL RNase-free CTAB溶液,20%  常溫

2 ug pCP20 pCP20 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

多功能氧化酶(MFO)測試盒可見分光光度法PPM2C  蛋酸2C抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-HDAC2(Ser394)  磷酸化組蛋白去乙酰化2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Acylglycerol Kinase  甘油酯激線粒體抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Cathepsin G/CTSG  組織蛋白G抗體 規(guī)格: 0.1ml

ASH1L  ASH1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

MRC1/CD206  巨噬細(xì)胞甘露糖受體抗體 0.2ml

ULBP1/N2DL1  UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

NYS48  NYS48蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

FUCA1/Alpha L fucosidase I  α-L巖藻糖苷抗體 0.2ml

RELM beta/CCGR  結(jié)腸相關(guān)基因蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

PCDHGA9  原鈣粘蛋白γA9抗體 規(guī)格: 0.2ml

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