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NO含量測試盒微量法

簡要描述:NO含量測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:10%纖維二糖水溶液 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:5ml×10支 霍亂紅胨水 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 BTB培養(yǎng)基 英文名稱:BTB,Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g PAC斜面培養(yǎng)基 英文名稱:Plate Count Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-28
  • 訪  問  量:1160

詳細(xì)介紹

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:NO含量測試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

檢測方法:微量法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6488

產(chǎn)品分類:氮代謝系列
商品介紹:

測定意義:

NONitric OxideNO)廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中,特別是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細(xì)胞間及細(xì)胞內(nèi)的信息物質(zhì),發(fā)揮信號傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機(jī)體的生理、病理過程中起著重要的作用。

測定原理:

NO在體內(nèi)或水溶液中極易氧化生成NO2—,在酸性條件下,NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進(jìn)一步與萘基乙烯基二胺偶合,產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計算NO含量。為了排除樣品色素等的影響,每個樣品需做對照管。

自備實驗用品及儀器:

天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

1 管 GV3101農(nóng)桿菌 GV3101 Agrobacterium Strain -80℃保存

2 ug pSilencer 2.1-U6 hygro pSilencer 2.1-U6 hygro 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

5次 97孔板病毒RNAout(離心法) 97 Microwell Plate Vrial RNAOUT 4℃保存

2 ug pCMV-Flag-3 pCMV-Flag-3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

培養(yǎng)基 Glycine Medium 250g

1g  G 鈉鹽 Penicillin G Sodium Salt 室溫保存

50T 人肥胖易感基因825T PCR測定試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

2 mg  BAY 11-7082(NF-κB抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

100mL CHES Buffer,0.5M,pH9.5   CHES Buffer,0.5M,pH9.5   常溫保存

5次 TdT加尾法DNA標(biāo)記試劑盒 TdT-Tailing DNA Labeling Kit Series -20℃保存

2 ug phMGFP phMGFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

NO含量測試盒微量法ZDHHC21  γ-氨基丁酸A受體相關(guān)膜蛋白3 規(guī)格: 0.2ml

YES1  原基因酪蛋白激Yes1抗體 規(guī)格: 0.1ml

PKC beta 1/2  蛋白激C beta 1/2抗體 規(guī)格: 0.1ml

KLK4  激肽釋放4抗體 規(guī)格: 0.1ml

C3orf39  3號染色體開放閱讀框39抗體 規(guī)格: 0.2ml

CCDC116  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白116抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-IRS-1(Ser307)  磷酸化胰島素受體底物p-IRS-1/2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Claudin 8  緊密連接蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

c-Abl/Abl1  非受體酪激c-Abl抗體 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

DLX4  DLX4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Acetyl-Histone H4(K5)  乙酰化組蛋白H4抗體 0.1ml 

 


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