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當前位置:首頁   >  產品中心  >  基因檢測PCR試劑盒  >  熒光定量PCR  >  50次大腸桿菌通用PCR試劑盒

大腸桿菌通用PCR試劑盒

簡要描述:大腸桿菌通用PCR試劑盒及公司相關產品豬小腸上皮細胞;ZYM-DIEC02正辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))n-Octanoic acid質量規格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人細胞裂解液 (陽性對照) 十八烷(Standard for G

  • 產品型號:50次
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2024-01-02
  • 訪  問  量:729

詳細介紹

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0E1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。產品僅用于科研
特異性強
PCR
反應的特異性決定因素為:
引物與模板DNA特異正確的結合;
堿基配對原則;
Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
靶基因的特異性與保守性。
產品名稱:大腸桿菌通用PCR試劑盒 
產品規格: 50
產品貨號:BK-P97041
儲存條件:-20避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

產品特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產品特點:
1.
使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2.
反應緩沖液經充分優化,反應靈敏快速,40個循環只需20多分鐘;
3.
抗干擾能力強,反應重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

特異性熒光標記:
TaqMan

TaqMan
探針的特性:
15′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC
23′端標記有熒光淬滅基團 Quencher, Q
3)探針完整,R所發射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, RQ分開,發熒光
4Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內標定量:
內標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數恒定,受環境因素影響小,內標定量結果代表了樣本中所含細胞或基因組數量。

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNARNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNARNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
胰島素();重組人胰島素  Human recombinant Insulin  分子式:C257H383N65O77S6      分子量:5807.58

粘蛋白  Mucin from bovine submaxillary glands  物理性狀及指標:  外觀:……………………凍干粉

重組蛋白G瓊脂糖凝膠FF  rProtein G Sepharose  技術指標:  基質:……………………6%高度偶聯的瓊脂糖凝膠

DiI標記氧化型低密度脂蛋白()  Human DiI-Ox-LDL  技術
麗春紅S  Ponceau S  分子式:C22H12N4Na4O13S4            分子量:760.57

亮綠SF(淡黃)  Light Green SF Yellowish  分子式:C37H34N2O9S3.2Na          分子量:792.85

硫堇(>90%,BS)  Thionin  分子式:C12H10N3S.C2H3O2      分子量:287.34

羅丹明6G/堿性紅1/玫瑰紅6G  Rhodamine 6G  分子式:C28H31N2O3.Cl         分子量:479.02

玫紅酸(AR)  Rosolic acid  分子式:C19H14O3  分子量:290.31
重酸鉀shēng huà shì jì容量:5  Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規格:96T/48T

酵母氮基礎-無基酸無銨NA  HumanAquaporin1,AQP-1ELISAKit人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T

二乙酸鋁,英文名或英文縮寫:Aluminum acetate basic,級別:AR,規格:100毫升  人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

玫紅酸 p-Rosolic acid,85% 603-45-2 25G 通用試劑  兔子骨形成蛋白2(BMP2)免疫試劑盒 Rabbit Bone morphogenetic protein 2,BMP2 ELISA kit

DL-柏安醋 DL-2-cmino-4-mqthylpqntcnoic ccid 38-39-  沙眼衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒 ,英文名: CPAF ELISA Kit
大腸桿菌通用PCR試劑盒移液器P20100毫克保存:-20  HumanActivinA,ACV-AELISAKit人活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒規格:96T/48T

Casaminoacids,Vitaminassay 100g原裝 BD 228820  人促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

乙二安四乙酸二鈉鋅鹽shēng huà shì jì容量:28100  小鼠17-酮類固醇(17-KS)免疫試劑盒 Mouse 17-ketosteroids,17-KS ELISA


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