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  • 2021

    3-11

    跳躍病病毒PCR檢測(cè)試劑盒使用方法:一、樣品RNA的制備1、用自選方法抽提病毒樣品RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒RNAout2、或柱式病毒RNAout。二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成cDNA1.按下表配制RT反應(yīng)體系(20μL體系)2.70℃保溫5分鐘變性模板后立即冰浴。3.嚴(yán)格按順序加入6μLRTBuffer(含dNTP)和2μLMMLV逆轉(zhuǎn)錄酶(含RI),反應(yīng)終體積為20μL。4.42℃保溫60分鐘。此步為RT反應(yīng)。5.70℃保溫10分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰...

  • 2021

    3-10

    大森林埃博拉病毒PCR檢測(cè)試劑盒操作流程:1.根據(jù)要保存的各樣本的體積,計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍(如100mg組織約用1mlRNAwait);離心收集2×106細(xì)胞RNAwait的用量是1ml。2.將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中;3.快速將較大的組織切成厚度4.保存時(shí)先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過(guò)夜(4℃過(guò)夜是必需的,這樣可使RNAwait*滲入到組織中),然后轉(zhuǎn)移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃時(shí)...

  • 2021

    3-4

    鴨子催乳素(PRL/LTH)ELISA試劑盒操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第...

  • 2021

    3-3

    皰疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒操作反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長(zhǎng)度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。③引物堿基:G+C...

  • 2021

    3-2

    小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)檢測(cè)ELISA試劑盒反應(yīng)步驟:(1)嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。(2)加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少...

  • 2021

    2-25

    眼蜱通用探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟:①產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。②兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RN...

  • 2021

    2-24

    地黃染料法PCR鑒定試劑盒注意事項(xiàng):1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連...

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